主题
核酸的结构与功能
核酸的化学组成
- 元素:C、H、O、N、P(含磷量9~10%→定量测定基础)
- 基本单位:核苷酸 = 碱基 + 核糖 + 磷酸
| 核酸 | 戊糖 | 碱基 |
|---|---|---|
| DNA | 脱氧核糖 | A、G、C、T |
| RNA | 核糖 | A、G、C、U |
- 核苷 = 碱基 + 戊糖(糖苷键);核苷酸 = 核苷 + 磷酸(酯键)
- 一级结构:核苷酸通过3',5'-磷酸二酯键连接,方向5'→3'
DNA空间结构与功能
**双螺旋结构模型(Watson & Crick, 1953)**要点:
- 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一轴盘旋
- 碱基对位于内侧(A=T, G≡C),遵循Chargaff规则
- 螺旋直径2nm,螺距3.4nm(10bp),相邻碱基对间距0.34nm
- 大沟和小沟:蛋白质识别结合位点
DNA二级结构多形性:B-DNA(标准右手)、A-DNA、Z-DNA(左手螺旋,可能与基因表达调控有关)
DNA功能:遗传信息的载体。基因→DNA分子上编码功能性产物的特定区段。
RNA的空间结构与功能
| RNA类型 | 特点 | 功能 |
|---|---|---|
| mRNA | 5'端帽子(m⁷GpppN)、3'端polyA尾,编码区含三联体密码子 | 蛋白质合成的模板 |
| tRNA | 二级结构为三叶草形(氨基酰臂、反密码环、TψC环、DHU环),含稀有碱基 | 转运氨基酸、"翻译器" |
| rRNA | 与蛋白质结合成核糖体(原核70S=30S+50S,真核80S=40S+60S) | 蛋白质合成场所 |
| 非编码RNA | miRNA、siRNA、lncRNA等 | 基因表达调控(miRNA→mRNA降解/翻译抑制) |
口诀:三叶草tRNA运氨基酸,帽子尾巴mRNA做模板
核酸的理化性质
- 紫外吸收:260nm(碱基共轭双键),定量测定依据
- DNA变性:加热/碱→双链解链为单链,增色效应(A₂₆₀升高)
- Tm值(解链温度):50%DNA解链时的温度。影响因素:G+C含量越高→Tm越高、离子强度
- 复性:缓慢降温→互补单链重新形成双螺旋(退火)
- 核酸分子杂交:不同来源的DNA/DNA或DNA/RNA通过碱基互补配对形成杂化双链→Southern/Northern blot等